Effect of<italic style="font-style: italic"> Hewei Anshen Formula</italic> （和胃安神方） on the Glu/GABA-Gln Cycle in the Suprachiasmatic Nucleus of Insomnia Model Rats

LIU Zihan; WANG Shuo; ZOU Tao; TIAN Chujiao; YU Hongyang; DI Ang; WANG Liang; CHEN Qi; WANG Changzhen; LI Shaodan

doi:10.13288/j.11-2166/r.2025.22.013

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Effect of Hewei Anshen Formula （和胃安神方） on the Glu/GABA-Gln Cycle in the Suprachiasmatic Nucleus of Insomnia Model Rats

更新时间：2025-11-25

- Effect of Hewei Anshen Formula （和胃安神方） on the Glu/GABA-Gln Cycle in the Suprachiasmatic Nucleus of Insomnia Model Rats
  增强出版
- Journal of Traditional Chinese Medicine Vol. 66, Issue 22, Pages: 2368-2375(2025)
- 作者机构：
  
  1.中国人民解放军医学院，北京市海淀区复兴路28号，100853
  2.中国人民解放军总医院第六医学中心
  3.中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13288/j.11-2166/r.2025.22.013
  CLC：
- Received：31 July 2025，
  
  Revised：2025-09-26，
  
  Published：17 November 2025
- 稿件说明：
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刘子涵,王硕,邹涛等.和胃安神方对失眠模型大鼠视交叉上核Glu/GABA-Gln循环的影响[J].中医杂志,2025,66(22):2368-2375.

LIU Zihan,WANG Shuo,ZOU Tao,et al.Effect of Hewei Anshen Formula （和胃安神方） on the Glu/GABA-Gln Cycle in the Suprachiasmatic Nucleus of Insomnia Model Rats[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,66(22):2368-2375.
刘子涵,王硕,邹涛等.和胃安神方对失眠模型大鼠视交叉上核Glu/GABA-Gln循环的影响[J].中医杂志,2025,66(22):2368-2375. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2025.22.013.

LIU Zihan,WANG Shuo,ZOU Tao,et al.Effect of Hewei Anshen Formula （和胃安神方） on the Glu/GABA-Gln Cycle in the Suprachiasmatic Nucleus of Insomnia Model Rats[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,66(22):2368-2375. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2025.22.013.

摘要

目的

从视交叉上核（SCN）中谷氨酸（Glu）/γ-氨基丁酸（GABA）-谷氨酰胺（Gln）循环探讨和胃安神方治疗失眠的可能作用机制。

方法

将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、艾司唑仑组与和胃安神方低、中、高剂量组，每组10只。除正常对照组外，其余各组大鼠采用腹腔注射对氯苯丙氨酸法构建失眠大鼠模型。大鼠造模成功后正常对照组和模型对照组予10 ml/kg生理盐水灌胃，艾司唑仑组予0.33 mg/（kg·d）艾司唑仑药液灌胃，和胃安神方低、中、高剂量组分别予1、2、4 g/ml浓度的和胃安神方药液以10 ml/kg灌胃，均每日1次，连续7天。试验期间观察大鼠一般情况并每天记录体质量。灌胃结束后采用戊巴比妥钠协同实验记录大鼠睡眠潜伏期和睡眠时间，采用Western Blot法和免疫荧光法检测大鼠SCN中Glu/GABA-Gln循环相关酶［谷氨酸脱羧酶（GAD）、γ-氨基丁酸转氨酶（GABA-T）、谷氨酰胺酶（PAG）、谷氨酰胺合成酶（GS）］及转运体［γ-氨基丁酸转运体1（GAT-1）、γ-氨基丁酸转运体3（GAT-3）、谷氨酸转运体1（EAAT1）、谷氨酸转运体2（EAAT2）］的蛋白水平。

结果

与正常对照组同时间比较，模型对照组给药第1—7天体质量均降低（

＜0.01）。与模型对照组同时间比较，给药第5、6、7天时，艾司唑仑组与和胃安神方中、高剂量组体质量升高（

＜0.01）。与艾司唑仑组同时间比较，和胃安神方低剂量组第6天体质量降低（

＜0.05）。与正常对照组比较，模型对照组睡眠潜伏期增加、睡眠时间缩短，SCN中GAD、EAAT1、EAAT2蛋白水平及荧光强度降低，GAT-1、GAT-3、GABA-T、PAG、GS蛋白水平及荧光强度升高（

＜0.01）。与模型对照组比较，各药物干预组睡眠潜伏期缩短、睡眠时间增加，艾司唑仑组与和胃安神方高剂量组上述各指标均改善（

＜0.05或

＜0.01）。与艾司唑仑组比较，和胃安神方低、中、高剂量组睡眠时间缩短，和胃安神方低剂量组GAD、EAAT1、EAAT2蛋白水平降低，GAT-1蛋白水平及荧光强度升高，和胃安神方中剂量组EAAT1蛋白水平降低（

＜0.05或

＜0.01）。与和胃安神方高剂量组比较，和胃安神方低剂量组睡眠时间缩短，GAD、EAAT2蛋白水平降低，GAT-1蛋白水平及荧光强度升高（

＜0.01）。

结论

和胃安神方可有效改善失眠模型大鼠的失眠状态，其作用机制可能与调节SCN中Glu/GABA-Gln循环相关酶与转运体有关，且以高剂量效果最佳。

Abstract

Objective

To explore the possible mechanism of

Hewei Anshen Formula

（和胃安神方， HAF） in the treatment of insomnia by investigating the Glu/GABA-Gln

cycle in the suprachiasmatic nucleus （SCN）.

Methods

Sixty male SD rats were randomly divided into normal control group， model control group， eszopiclone group， and HAF low-， medium-， and high-dose group， with 10 rats in each group. Except for the normal control group， insomnia model rats were induced by intraperitoneal injection of para-chlorophenylalanine. After the model was established， the normal and model control groups were given 10 ml/kg of normal saline by gastric gavage， while the eszopiclone group was given 0.33 mg/（kg·d） of eszopiclone by gastric gavage， and the low-， medium-， and high-dose HAF group was given 10 ml/kg of HAF by gastric gavage at concentrations of 1， 2， and 4 g/ml， respectively； all treatments were administered once a day for 7 consecutive days. During the experiment， the general condition of the rats was observed， and body weight was recorded daily. After the treatment， sleep latency and sleep duration were recorded using a pentobarbital sodium-induced experiment. The protein levels of Glu/GABA-Gln cycle-related enzymes including glutamic acid decarboxylase （GAD）， γ-aminobutyric acid transaminase （GABA-T）， glutaminase （PAG）， and glutamine synthetase （GS）， and the transporters including GABA transporter 1 （GAT-1）， GABA transporter 3 （GAT-3）， glutamate transporter 1 （EAAT1）， and glutamate transporter 2 （EAAT2）） in the SCN of the rats were measured using Western Blot and immunofluorescence methods.

Results

Compared to the normal control group， the body weight of the rats in the model control group decreased on day 1-7 of administration （

＜0.01）. Compared to the model control group， the body weight of the rats in the eszopiclone group and the medium- and high-dose HAF groups increased on day 5， 6， and 7 （

＜0.01）. Compared to the eszopiclone group， the body weight of the rats in the low-dose HAF group decreased on day 6 （

＜0.05）. Compared to the normal control group， the model c

ontrol group had an increased sleep latency， shortened sleep duration， and decreased relative expression of GAD， EAAT1， and EAAT2 proteins in the SCN， as well as increased expression of GAT-1， GAT-3， GABA-T， PAG， and GS proteins

（P

＜0.01）. Compared to the model control group， the sleep latency in all drug intervention groups was shortened， and sleep duration increased， with the eszopiclone group and the high-dose HAF group showing the most significant improvement （

＜0.05 or

＜0.01）. Compared to the eszopiclone group， the sleep duration of all three HAF groups was shorter， with the low-dose HAF group showing a decrease in GAD， EAAT1， and EAAT2 protein expression， and an increase in GAT-1 protein expression as well as decrease in EAAT1 protein relative expression in medium-dose HAF group （

＜0.05 or

＜0.01）. Compared to the high-dose HAF group， the low-dose group had a shorter sleep duration， decreased GAD and EAAT2 protein expression， and increased GAT-1 protein expression （

＜0.01）.

Conclusion

HAF can effectively improve the insomnia status in insomnia model rats. The mechanism of action may be related to the regulation of Glu/GABA-Gln cycle-related enzymes and transporters in the SCN， with the high dose showing the best effect.

关键词

Keywords

references

CLARKE K ， ORLOV N ， SOONG C . Treatment of chronic insomnia in adults ［J］. Can Fam Physician ， 2024 ， 70 （ 3 ）： 176 - 178 .

SCHUELTER-TREVISOL F ， CIPRIANO FELIPPE F ， CAMARGO B ， et al . Incidence of adverse effects and misuse of zolpidem ［J］. J Pharm Technol ， 2025 ， 14 ： 87551225251324856 . doi： 10.1177/87551225251324856 http://dx.doi.org/10.1177/87551225251324856 .

罗海鸥，杨明会，李绍旦，等 . 和胃安神方治疗失眠117例临床观察［J］. 激光杂志， 2012 ， 33 （ 5 ）： 88 - 90 .

李绍旦，周登峰，黎发根，等 . 和胃安神法治疗失眠症的临床研究［J］. 北京中医药， 2014 ， 33 （ 11 ）： 807 - 809 .

YU S ， SHEN Z ， XU H ， et al . Top-down and bottom-up alterations of connectivity patterns of the suprachiasmatic nucleus in chronic insomnia disorder ［J］. Eur Arch Psychiatry Clin Neurosci ， 2024 ， 274 （ 2 ）： 245 - 254 .

HASTINGS MH ， MAYWOOD ES ， BRANCACCIO M . Generation of circadian rhythms in the suprachiasmatic nucleus ［J］. Nat Rev Neurosci ， 2018 ， 19 （ 8 ）： 453 - 469 .

JIANG C ， WANG H ， QI J ， et al . Antidepressant effects of cherry leaf decoction on a chronic unpredictable mild stress rat model based on the Glu/GABA-Gln metabolic loop ［J］. Metab Brain Dis ， 2022 ， 37 （ 8 ）： 2883 - 2901 .

黎发根，李绍旦，杨明会，等 . 和胃安神方对失眠大鼠脑组织谷氨酸与γ-氨基丁酸含量的影响［J］. 中国中医药信息杂志， 2013 ， 20 （ 2 ）： 50 - 52 .

郭海波，王慧 . 对氯苯丙氨酸在动物失眠模型中的应用概述［J］. 中国比较医学杂志， 2019 ， 29 （ 6 ）： 135 - 140 .

夏天吉，闫明珠，王智，等 . 大小鼠失眠模型和评价方法研究进展［J］. 中国实验动物学报， 2022 ， 30 （ 3 ）： 428 - 435 .

NAIR AB ， JACOB S . A simple practice guide for dose conversion between animals and human ［J］. J Basic Clin Pharm ， 2016 ， 7 （ 2 ）： 27 - 31 .

胡金，韦姗姗，邱祥玉，等 . 筛选镇静催眠药物的动物实验评价［J］. 中国比较医学杂志， 2023 ， 33 （ 4 ）： 133 - 140 .

MORIN CM ， JARRIN DC . Epidemiology of insomnia： prevalence， course， risk factors， and public health burden ［J］. Sleep Med Clin ， 2022 ， 17 （ 2 ）： 173 - 191 .

李东岳，梅荣，李绍旦，等 . 和胃安神方治疗原发性失眠的临床研究［J］. 环球中医药， 2012 ， 5 （ 8 ）： 585 - 587 .

田楚娇，王亮，王硕，等 . 和胃安神方治疗应激性失眠男性患者52例随机对照试验［J］. 中医杂志， 2024 ， 65 （ 22 ）： 2326 - 2331 .

SCHWARTZ JR ， ROTH T . Neurophysiology of sleep and wakefulness： basic science and clinical implications ［J］. Curr Neuropharmacol ， 2008 ， 6 （ 4 ）： 367 - 378 .

CAO L ， FENG R ， GAO Y ， et al . Suprachiasmatic nucleus functional connectivity related to insomnia symptoms in adolescents with major depressive disorder ［J］. Front Psychiatry ， 2023 ， 14 ： 1154095 . doi： 10.3389/fpsyt.2023.1154095 http://dx.doi.org/10.3389/fpsyt.2023.1154095 .

RALPH MR ， FOSTER RG ， DAVIS FC ， et al . Transplanted suprachiasmatic nucleus determines circadian period ［J］. Science ， 1990 ， 247 （ 4945 ）： 975 - 978 .

AZZI A ， EVANS JA ， LEISE T ， et al . Network dynamics mediate circadian clock plasticity ［J］. Neuron ， 2017 ， 93 （ 2 ）： 441 - 450 .

HASTINGS MH ， ROBERTS AC ， HERBERT J . Neurotoxic lesions of the anterior hypothalamus disrupt the photoperiodic but not the circadian system of the Syrian hamster ［J］. Neuroendocrinology ， 1985 ， 40 （ 4 ）： 316 - 324 .

SCHMAL C ， HERZOG ED ， HERZEL H . Measuring relative coupling strength in circadian systems ［J］. J Biol Rhythms ， 2018 ， 33 （ 1 ）： 84 - 98 .

YU X ， LI W ， MA Y ， et al . GABA and glutamate neurons in the VTA regulate sleep and wakefulness ［J］. Nat Neurosci ， 2019 ， 22 （ 1 ）： 106 - 119 .

MARTIN DL ， RIMVALL K . Regulation of gamma-aminobutyric acid synthesis in the brain ［J］. J Neurochem ， 1993 ， 60 （ 2 ）： 395 - 407 .

SEARS SM ， HEWETT SJ . Influence of glutamate and GABA transport on brain excitatory/inhibitory balance ［J］. Exp Biol Med （Maywood）， 2021 ， 246 （ 9 ）： 1069 - 1083 .

KANG JQ . Defects at the crossroads of GABAergic signaling in generalized genetic epilepsies ［J］. Epilepsy Res ， 2017 ， 137 ： 9 - 18 . doi： 10.1016/j.eplepsyres.2017. 08.013 http://dx.doi.org/10.1016/j.eplepsyres.2017.08.013 .

DELEEUW MB ， SHEN W ， TIAN X ， et al . 4-Phenylbutyrate restored GABA uptake， mitigated seizures in SLC6A1 and SLC6A11 microdeletions/3p- syndrome： from cellular models to human patients ［J］. Epilepsy Res ， 2025 ， 210 ： 107514 . doi： 10.1016/j.eplepsyres.2025.107514 http://dx.doi.org/10.1016/j.eplepsyres.2025.107514 .

PARK MG ， LIM J ， KIM D ， et al . Suppressing astrocytic GABA transaminase enhances tonic inhibition and weakens hippocampal spatial memory ［J］. Exp Mol Med ， 2025 ， 57 （ 2 ）： 379 - 389 .

MCKENNA MC . The glutamate-glutamine cycle is not stoichiometric： fates of glutamate in brain ［J］. J Neurosci Res ， 2007 ， 85 （ 15 ）： 3347 - 3358 .

TAKAHASHI K ， ISHIBASHI Y ， CHUJO K ， et al . Neuroprotective potential of L-glutamate transporters in human induced pluripotent stem cell-derived neural cells against excitotoxicity ［J］. Int J Mol Sci ， 2023 ， 24 （ 16 ）： 12605 .

STORCK T ， SCHULTE S ， HOFMANN K ， et al . Structure， expression， and functional analysis of a Na（+）- dependent glutamate/aspartate transporter from rat brain ［J］. Proc Natl Acad Sci U S A ， 1992 ， 89 （ 22 ）： 10955 - 10959 .

BAEK JH ， PARK H ， KANG H ， et al . The role of glutamine homeostasis in emotional and cognitive functions ［J］. Int J Mol Sci ， 2024 ， 25 （ 2 ）： 1302 .

GONZÁLEZ-GONZÁLEZ IM ， CUBELOS B ， GIMÉNEZ C ， et al . Immunohistochemical localization of the amino acid transporter SNAT2 in the rat brain ［J］. Neuroscience ， 2005 ， 130 （ 1 ）： 61 - 73 .

ANDERSEN JV . The glutamate/GABA-glutamine cycle： insights， updates， and advances ［J］. J Neurochem ， 2025 ， 169 （ 3 ）： e70029 .

ZHANG XH ， ZHANG X ， LIU XW ， et al . Examining the role of GLU/GABA to GLN metabolic cycle in the pathogenesis of post-stroke depressive disorder and insomnia ［J］. Neuropsychiatr Dis Treat ， 2023 ， 19 ： 2833 - 2840 . doi： 10.2147/NDT.S443844 http://dx.doi.org/10.2147/NDT.S443844 .

QIAO T ， WANG Y ， LIANG K ， et al . Effects of the Radix Ginseng and Semen Ziziphi Spinosae drug pair on the GLU/GABA-GLN metabolic cycle and the intestinal microflora of insomniac rats based on the brain-gut axis ［J］. Front Pharmacol ， 2022 ， 13 ： 1094507 . doi： 10. 3389/fphar.2022.1094507 http://dx.doi.org/10.3389/fphar.2022.1094507 .

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Effect of Hewei Anshen Formula （和胃安神方） on the Glu/GABA-Gln Cycle in the Suprachiasmatic Nucleus of Insomnia Model Rats

DOI：10.13288/j.11-2166/r.2025.22.013

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