基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响

马钦海; 陈瑞晗; 雷标; 王周琅; 谢玉琪; 刘斌; 杨子峰

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基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响

XXXX | 更新时间：2021-12-14

- 基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响
- 暂无标题
- 中医杂志 2021年页码：1-7
- 作者机构：
  
  1.广州医科大学附属第一医院，广东省广州市越秀区东风西路195号，511436
  2.昆明理工大学医学院
- 作者简介：
  
  jeffyah@163.com，（020）37103057
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金(82004033);广东省基础与应用基础研究基金(2020A1515111155);澳门科学技术发展基金(0172/2019/A3);中国博士后科学基金(2020T130028ZX);广东省普通高校省级重大科研项目(2020KZDZX1159)
- DOI：
  中图分类号：
- 收稿：2021-03-09，
  
  修回：2021-10-01，
- 稿件说明：
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马钦海,陈瑞晗,雷标等.基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响[J].中医杂志,
马钦海,陈瑞晗,雷标等.基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响[J].中医杂志, DOI：10.13288/j.11-2166/r...001.

DOI：

摘要

目的

探讨六神胶囊的抗炎作用及其机制。

方法

取对数生长期的RAW264.7细胞，分为六神胶囊组和地塞米松组，六神胶囊按9.76、4.88、2.44、1.22、0.61、0.31、0.15 μg/ml梯度稀释；地塞米松按250、125、62.5、31.25、15.63、7.81、3.91 μg/ml梯度稀释，选择细胞存活率大于90%的最大3个六神胶囊浓度和最大无毒剂量的地塞米松进行后续实验。RAW264.7细胞分为空白组、地塞米松组、模型组及六神胶囊高、中、低剂量组，每组3个复孔。除空白组外，其余各组加入500 ng/ml脂多糖（LPS）1 ml刺激1 h诱导建立炎症模型。造模后六神胶囊高、中、低剂量组分别加入筛选浓度的高、中、低浓度的六神胶囊溶液各1 ml；地塞米松组加入筛选浓度的地塞米松溶液1 ml；模型组和空白组加入1ml培养液。24 h后收集细胞上清液检测一氧化氮（NO）的浓度，ELISA法检测细胞中白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的含量，实时荧光定量PCR检测细胞中IL-1β、TNF-α、IL-6和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA水平的表达，蛋白印迹实验检测核因子κB p65（NF-κB p65）、磷酸化核因子κB p65（p-NF-κB p65）、核因子抑制蛋白κB（IκBα）和磷酸化核因子抑制蛋白κB（p-IκBα）的表达。

结果

选择六神胶囊1.22、0.61、0.31 μg/ml浓度，地塞米松31.25 μg/ml浓度进行后续实验。与空白组比较，模型组细胞中NO、IL-6、IL-1β及TNF-α水平，IL-6、IL-1β、TNF-α和iNOS mRNA表达，p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达显著升高，IκBα蛋白表达显著降低（

＜0.01）；与模型组比较，地塞米松组及六神胶囊中、高剂量组细胞NO、IL-6、IL-1β和TNF-α水平，IL-6、TNF-α、IL-1β和iNOS mRNA表达，p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达均显著降低，IκBα蛋白表达升高（

＜0.05或

＜0.01）；与地塞米松组比较，六神胶囊高剂量组IL-1β水平降低、IL-6水平升高，TNF-α mRNA及p-NF-κB p65蛋白表达显著降低（

＜0.01）；六神胶囊高剂量组TNF-α、IL-1β含量，IL-6、TNF-α mRNA表达，p-NF-κB p65蛋白表达低于六神胶囊中、低剂量组（

＜0.01）。

结论

六神胶囊在体外具有良好的抗炎活性，可能通过抑制NF-κB信号通路的激活，降低iNOS的表达，进一步抑制NO的合成和炎性细胞因子的产生，达到改善炎症反应的目的，且以高剂量效果较佳。

Abstract

关键词

Keywords

references

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