化瘀消癥颗粒对低氧状态下滋养细胞增殖、黏附与自噬的影响

袁烁; 张家旗; 王宣尹; 邓高丕

doi:10.13288/j.11-2166/r.2021.19.011

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

化瘀消癥颗粒对低氧状态下滋养细胞增殖、黏附与自噬的影响

实验研究 | 更新时间：2021-10-12

- 化瘀消癥颗粒对低氧状态下滋养细胞增殖、黏附与自噬的影响
- Effects of Huayu Xiaozheng Granules （化瘀消癥颗粒） on Proliferation， Adhesion and Autophagy of Trophoblast Cells under Hypoxia
- 中医杂志 2021年62卷第19期页码：1715-1719
- 作者机构：
  
  1.广州中医药大学第一附属医院，广东省广州市机场路16号，510405
  2.广州中医药大学第一临床医学院
- 作者简介：
  
  denggaopi@126.com，（020）36591369
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金(81804134);广东省自然科学基金(2018A030313469);2019年广东省名中医传承工作室建设项目(粤中医办函【2019】5号)
- DOI：10.13288/j.11-2166/r.2021.19.011
  中图分类号：
- 收稿：2021-02-28，
  
  修回：2021-07-20，
  
  纸质出版：2021-10-02
- 稿件说明：
移动端阅览
袁烁,张家旗,王宣尹等.化瘀消癥颗粒对低氧状态下滋养细胞增殖、黏附与自噬的影响[J].中医杂志,2021,62(19):1715-1719.

YUAN Shuo,ZHANG Jiaqi,WANG Xuanyin,et al.Effects of Huayu Xiaozheng Granules （化瘀消癥颗粒） on Proliferation， Adhesion and Autophagy of Trophoblast Cells under Hypoxia[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2021,62(19):1715-1719.
袁烁,张家旗,王宣尹等.化瘀消癥颗粒对低氧状态下滋养细胞增殖、黏附与自噬的影响[J].中医杂志,2021,62(19):1715-1719. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2021.19.011.

YUAN Shuo,ZHANG Jiaqi,WANG Xuanyin,et al.Effects of Huayu Xiaozheng Granules （化瘀消癥颗粒） on Proliferation， Adhesion and Autophagy of Trophoblast Cells under Hypoxia[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2021,62(19):1715-1719. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2021.19.011.

摘要

目的

探讨化瘀消癥颗粒治疗输卵管妊娠的可能作用机制。

方法

人源妊娠滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞消化计数后接种至96孔板，分别设空白组、低氧组和化瘀消癥颗粒低、中、高剂量组，每组3个复孔。低氧组和化瘀消癥颗粒低、中、高剂量组每孔加入含400 μmol/L二氯化钴（CoCl

）0.1 ml作用24 h建立低氧模型。造模后化瘀消癥颗粒低、中、高剂量组在培养液中分别加入20 mg/ml化瘀消癥颗粒母液50、100、150 μl分别作用24 h、48 h、72 h后，采用CCK8法筛选后续实验药物干预时间。采用同上分组及干预方法，根据CCK8检测结果确定作用时间，采用细胞划痕实验观察各组细胞迁移情况并计算细胞迁移率，采用 Western-blot法检测细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）、神经钙黏蛋白（N-cadherin）与自噬标志蛋白（Beclin-1）、微管相关蛋白轻链3蛋白Ⅱ（LC3-Ⅱ）表达。

结果

根据CCK8法检测结果确定作用时间为48 h继续后续实验。与空白组比较，低氧组细胞迁移率升高，HIF-1α、N-cadherin、Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白相对表达量均升高，E-cadherin蛋白相对表达量降低（

＜0.05）。与低氧组比较，化瘀消癥颗粒低、中、高剂量组细胞迁移率降低，HIF-1α、N-cadherin、Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白相对表达量降低，且呈浓度依赖性（

＜0.05）；化瘀消癥颗粒高、低剂量组E-cadherin蛋白相对表达量升高，且化瘀消癥颗粒高剂量组升高更显著（

＜0.05）。

结论

化瘀消癥颗粒可能通过抑制低氧所导致的滋养细胞的增殖、黏附、自噬活性，而发挥治疗输卵管妊娠的作用，以高剂量效果更佳。

Abstract

Objective

To explore the possible mechanism of Huayu Xiaozheng Granules （化瘀消癥颗粒， HXG） in treatment of tubal pregnancy.

Methods

The human gestational trophoblast cell line HTR-8/SVneo cells were counted after digestion and seeded in 96-well plates， with three duplicate wells in each group of blank group， hypoxia group， HXG low， medium and high dose groups.The hypoxia model was established 24 hours after giving 0.1 ml CoCl

（400 μmol/L） into each duplicate well in the hypoxia group， HXG low， medium and high dose groups

。

After modeling， the mother liquor of HXG （20 mg/ml）at the dose of 50 μl， 100 μl，and 150 μl were added into the culture medium of the HXG low， medium and high dose groups correspondingly， and were observed for 24 h， 48 h and 72 h， based on which the intervention time of the subsequent experiments was determined through CCK8 method.The scratch assay was used to observe the cell migration of each group， and the cell migration rate was calculated. The expression of cellular hypoxia-inducible factor 1α （HIF-1α）， epithelial cell cadherin （E-cadherin）， neural cadherin （N-cadherin）， the iconic protein of autophagy （Beclin-1） and microtubule-associated protein light chain 3 protein Ⅱ （LC3-Ⅱ） were detected through Western blotting.

Results

HXG may act on tubal pregnancy by inhibiting the proliferation， adhesion and autophagy activity under hypoxia， and higher dose is associated with better effect.

关键词

Keywords

references

ZOU S ， LI X ， FENG Y ， et al . Comparison of the diagnostic values of circulating steroid hormones， VEGF-A， PIGF， and ADAM12 in women with ectopic pregnancy ［J］. J Transl Med ， 2013 ， 11 ： 44 . doi： 10.1186/1479-5876-11-44 http://dx.doi.org/10.1186/1479-5876-11-44 .

ZHAN Z ， PENGYUN L ， YAN W ， et al . Hypoxia‐induced expression of CXCR4 favors trophoblast cell migration and invasion via the activation of HIF‐1α ［J］. Int J Mol Med ， 2018 ， 42 （ 3 ）： 1508 - 1516 .

罗颂平，刘雁峰 . 中医妇科学［M］. 3版 . 北京：人民卫生出版社， 2017 ： 164 - 170 .

中国中西医结合学会妇产科专业委员会 . 输卵管妊娠中西医结合诊疗指南［J］. 中国实用妇科与产科杂志， 2021 ， 37 （ 2 ）： 172 - 180 .

邱嫔，廖慧妍，李安，等 . 化瘀消癥颗粒治疗早期输卵管妊娠的临床疗效观察［J］. 广州中医药大学学报， 2019 ， 36 （ 2 ）： 209 - 214 .

孙建华，郜洁，刘开飞，等 . 化瘀消癥颗粒对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo侵袭迁移的影响［J］. 中成药， 2019 ， 41 （ 11 ）： 2761 - 2765 .

CHENGJIN H ， NAN S ， PING X ， et al . Hypoxia-induced downregulation of SRC-3 suppresses trophoblastic invasion and migration through inhibition of the AKT/mTOR pathway： implications for the pathogenesis of preeclampsia ［J］. Sci Rep ， 2019 ， 9 （ 1 ）： 10349 .

WAKELAND AK ， FRANCESCA S ， MATTEO M ， et al . Hypoxia directs human extravillous trophoblast differentiation in a hypoxia-inducible factor-dependent manner ［J］. Am J Pathol ， 2017 ， 187 （ 4 ）： 767 - 780 ．

CHANGDAI G ， SOHAE P ， JIN S ， et al . Altered expression of ADM and ADM2 by hypoxia regulates migration of trophoblast and HLA-G expression ［J］. Biol Reprod ， 2021 ， 104 （ 1 ）： 159 - 169 .

谢幸，孔北华，段涛 . 妇产科学［M］. 9版 . 北京：人民卫生出版社， 2018 ： 75 .

WANG Y ， ZHU F ， ZHANG Y ， et al . Shikonin suppresses trophoblast cell growth via regulation of GLI1， and p62 mediated caspase 8 activation ［J］. Reprod Toxicol ， 2020 ， 95 ： 104 - 112 . doi： 10.1016/j.reprotox. 2020. 05.011 http://dx.doi.org/10.1016/j.reprotox.2020.05.011 .

APPEL S ， ANKERNE J ， APPEL J ， et al . CNN3 regulates trophoblast invasion and is upregulated by hypoxia in BeWo cells ［J］. PLoS One ， 2014 ， 9 （ 7 ）： e103216 .

SENO K ， TANIKAWA N ， TAKAHASHI H ， et al . Oxygen concentration modulates cellular senescence and autophagy in human trophoblast cells ［J］. Am J Reprod Immunol ， 2018 ， 79 （ 6 ）： e12826 .

LI Y ， LV Z ， ZHANG S ， et al . Genetic fate mapping of transient cell fate reveals N-Cadherin activity and function in tumor metastasis ［J］. Dev Cell ， 2020 ， 54 （ 5 ）： 593 - 607 .

BURTON GJ ， CINDROVA-DAVIES T ， YUNG HW ， et al . Oxygen and development of the human placenta ［J］. Reproduction ， 2020 ， 161 （ 1 ）： F53 - F65 .

MULTHAUP A ， HUPPERTZ B ， GÖHNER C ， et al . N-cadherin knockdown leads to disruption of trophoblastic and endothelial cell interaction in a 3D cell culture model： New insights in trophoblast invasion failure ［J］. Cell Adh Migr ， 2018 ， 12 （ 3 ）： 259 - 270 .

SONAM V ， AMANDEEP KK ， RAHUL PAL ， et al . BST2 regulates interferon gamma-dependent decrease in invasion of HTR-8/SVneo cells via STAT1 and AKT signaling pathways and expression of E-cadherin ［J］. J Cell Physiol ， 2019 ， 234 （ 11 ）： 19951 - 19963 .

YAN L ， CHRISTIAN K ， JUNG-CHIEN C ， et al . Activin A， B， and AB increase human trophoblast cell invasion by up-regulating N-cadherin ［J］. J Clin Endocrinol Metab ， 2014 ， 99 （ 11 ）： e2216 - e2225 .

BASTIDA-RUIZ D ， YART L ， WUILLEMIN C ， et al . The fine-tuning of endoplasmic reticulum stress response and autophagy activation during trophoblast syncytialization ［J］. Cell Death Dis ， 2019 ， 10 （ 9 ）： 651 .

CHIFENTI B ， LOCCI MT ， LAZZEERI G ， et al . Autophagy-related protein LC3 and Beclin-1 in the first trimester of pregnancy ［J］. Clin Exp Reprod Med ， 2013 ， 40 （ 1 ）： 33 - 37 .

LI M ， WU X ， AN P ， et al . Effects of resveratrol on autophagy and the expression of inflammasomes in a placental trophoblast oxidative stress model ［J］. Life Sci ， 2020 ， 256 ： 117890 . doi： 10.1016/j.lfs.2020.117890 http://dx.doi.org/10.1016/j.lfs.2020.117890 .

查看原文

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

龙蛭汤含药血清对人脐静脉内皮细胞增殖及自噬的影响

通便汤对慢传输型便秘模型大鼠结肠组织VAPB-PTPIP51复合物及Cajal间质细胞自噬的影响

滋阴明目丸对视网膜色素变性模型小鼠自噬的影响

参芪健心方对慢性心力衰竭模型大鼠心脏组织线粒体自噬及PINK1/Parkin信号通路的影响

艾灸“关元”穴对皮肤光老化模型大鼠皮肤组织氧化应激及自噬相关基因表达的影响