清郁和降汤对反流性食管炎模型大鼠食管组织LPS/TLR4/NF-κB通路及食管黏膜屏障的影响

黄雨晴; 周易; 黄鹤; 叶松

doi:10.13288/j.11-2166/r.2022.22.014

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

清郁和降汤对反流性食管炎模型大鼠食管组织LPS/TLR4/NF-κB通路及食管黏膜屏障的影响

实验研究 | 更新时间：2022-11-11

- 清郁和降汤对反流性食管炎模型大鼠食管组织LPS/TLR4/NF-κB通路及食管黏膜屏障的影响
- Effect of Qingyu Hejiang Decoction（清郁和降汤）on LPS/TLR4/NFκB Pathway and Esophageal Mucosal Barrier in Reflux Esophagitis Model Rats
- 中医杂志 2022年63卷第22期页码：2170-2178
- 作者机构：
  
  1.湖北中医药大学，湖北省武汉市洪山区黄家湖西路16号，430065
  2.湖北省中医院
- 作者简介：
  
  18971475458@189.cn
- 基金信息：
- DOI：10.13288/j.11-2166/r.2022.22.014
  中图分类号：
- 收稿：2022-03-01，
  
  修回：2022-06-30，
  
  纸质出版：2022-11-17
- 稿件说明：
移动端阅览
黄雨晴,周易,黄鹤等.清郁和降汤对反流性食管炎模型大鼠食管组织LPS/TLR4/NF-κB通路及食管黏膜屏障的影响[J].中医杂志,2022,63(22):2170-2178.

HUANG Yuqing,ZHOU Yi,HUANG He,et al.Effect of Qingyu Hejiang Decoction（清郁和降汤）on LPS/TLR4/NFκB Pathway and Esophageal Mucosal Barrier in Reflux Esophagitis Model Rats[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2022,63(22):2170-2178.
黄雨晴,周易,黄鹤等.清郁和降汤对反流性食管炎模型大鼠食管组织LPS/TLR4/NF-κB通路及食管黏膜屏障的影响[J].中医杂志,2022,63(22):2170-2178. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2022.22.014.

HUANG Yuqing,ZHOU Yi,HUANG He,et al.Effect of Qingyu Hejiang Decoction（清郁和降汤）on LPS/TLR4/NFκB Pathway and Esophageal Mucosal Barrier in Reflux Esophagitis Model Rats[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2022,63(22):2170-2178. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2022.22.014.

摘要

目的

探讨清郁和降汤治疗反流性食管炎（RE）的可能作用机制。

方法

60只雄性SD大鼠中随机选择10只为假手术组，另外50只采用“前胃结扎+外置幽门部分结扎术”建立反流性食管炎模型。将造模成功的40只大鼠随机分成模型组、清郁和降汤组、雷贝拉唑+莫沙比利组和中西药联用组，每组10只。造模后假手术组及模型组分别予蒸馏水1 ml/100 g灌胃，清郁和降汤组予浓度为1.58 g/ml的清郁和降汤灌胃，雷贝拉唑+莫沙比利组予浓度为0.21 mg/ml的雷贝拉唑钠肠溶胶囊溶液和浓度为0.16 mg/ml的枸橼酸莫沙比利分散片溶液灌胃，中西药联用组予清郁和降汤、雷贝拉唑钠肠溶胶囊、枸橼酸莫沙比利分散片灌胃，剂量同上。各组灌胃量均为1 ml/100 g，持续14天。观察大鼠食管组织的病理学改变；检测大鼠血清中及食管组织中脂多糖（LPS）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）含量；检测食管组织中Toll样受体4（TLR4）、核转录因子κB（NF-κB） p65、封闭蛋白1（Cldn1）、封闭蛋白4（Cldn4） mRNA及蛋白表达水平。

结果

与假手术组比较，模型组大鼠食管黏膜损伤严重，肉眼观察可见充血、糜烂或溃疡，镜下可见食管鳞状上皮增厚并伴有基底细胞增生，黏膜固有层乳头延伸，大量炎性细胞浸润；与模型组比较，各给药组食管黏膜损伤明显减轻。与假手术组比较，模型组大鼠血清及食管组织LPS、IL-1β、IL-6、IL-8表达升高（

＜0.01），食管组织TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达升高，Cldn1、Cldn4 mRNA和蛋白表达降低（

＜0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠血清及食管组织LPS、IL-1β、IL-6、IL-8表达降低（

＜0.01），食管组织TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达降低，Cldn1、Cldn4 mRNA及蛋白表达升高（

＜0.05或

＜0.01）。与中西药联用组比较，清郁和降汤组、雷贝拉唑+莫沙比利组大鼠血清及食管组织LPS、IL-1β、IL-6、IL-8表达明显升高，TLR4、NF-κB p65蛋白表达明显升高，Cldn1、Cldn4 mRNA及蛋白表达明显降低（

＜0.05或

＜0.01）；与雷贝拉唑+莫沙比利组比较，清郁和降汤组大鼠血清LPS表达明显降低，食管组织IL-8表达及TLR4蛋白表达明显升高，Cldn4 蛋白表达明显降低（

＜0.05或

＜0.01）。

结论

清郁和降汤能够减轻RE大鼠食管黏膜损伤，与雷贝拉唑+莫沙比利联用具有协同作用，其机制可能与抑制食管组织LPS/TLR4/NF-κB通路，减轻食管炎症，增强食管上皮屏障功能有关。

Abstract

Objective

To explore the potential mechanism of

Qingyu Hejiang Decoction

（清郁和降汤， QHD） in the treatment of reflux esophagitis （RE）.

Methods

Ten out of 60 male SD rats were randomly selected as sham operation group， and the other 50 rats were treated with anterior gastric ligation and external pyloric partial ligation to establish the RE model. Forty successful models were randomly divided into model group， QHD group， rabeprazole + mosapride group and integrated traditional Chinese and western medicine group （integrated group）， with 10 rats in each group. After modeling， the rats in the sham operation group and the model group were perfused with 1 ml/100 g of distilled water， while those in the QHD group were given 1.58 g/ml of QHD， and those in the rabeprazole + mosapride group were treated with 0.21 mg/ml of rabeprazole sodium enteric-coated capsule plus 0.16 mg/L of mosapride citrate dispersible tablet； rats in the integrated medicine group were treated with QHD， rabeprazole， and mosapride， in the same administration way as mentioned above. All the interventions were given at the dose of 1 ml/100 g by gavage， for 14 days. The pathological changes of rat esophagus were observed， and the contents of lipopolysaccharide （LPS）， interleukin-1β （IL-1β）， interleukin-6 （IL-6） and interleukin-8 （IL-8） in serum and esophageal tissue were detected. The mRNA levels and protein expressions of Toll-like receptor 4 （TLR4）， nuclear transcription factor κB （NF-κB） p65， occludin 1 （Cldn1） and occludin 4 （Cldn4） in esophageal tissue were detected.

Results

compared to those in the sham operation group， the esophageal mucosa of the model group was seriously injured， and hyperemia， erosion or ulcer could be seen with naked eyes， as well as thickening of esophageal squamous epithelium， proliferation of basal cells， extension of lamina propria papilla and infiltration of a large number of inflammatory cells seen under microscope. Compared to that in the model group， esophageal mucosal injury in other three intervention groups was significantly alleviated. Compared to those in the sham operation group， the expression of LPS， IL-1β， IL-6 and IL-8 in serum and esophageal tissue significantly increased in the model group （

＜0.01）， while the mRNA and protein expressions of TLR4 and NF-κB p65 increased， and the expressions of Cldn1， Cldn4 significantly decreased in the esophageal tissue （

＜0.01）. Compared to those in the model group， the expressions of LPS， IL-1β， IL-6 and IL-8 in serum and esophageal tissue in other three intervention groups significantly decreased （

＜0.01）， and the mRNA and protein expressions of TLR4 and NF- κ B p65 in esophageal tissue also significantly decreased， but the expressions of Cldn1 and Cldn4 significantly increased （

＜0.01 or

＜0.05）. Compared to those in the integrated medicine group， the expressions of LPS， IL-1β， IL-6 and IL-8 in serum and esophagus tissue in the QHD group and the rabeprazole + mosapride group significantly increased， as well as the protein expression of TLR4 and NF-κB p65， while mRNA and protein expression of Cldn1 and Cldn4 significantly decreased （

＜0.05 or

＜0.01）. The expression of LPS in serum significantly decreased in the QHD group compared to the rabeprazole + mosapride group， while the expression of IL-8 and TLR4 protein in esophageal tissue significantly increased， and the expression of Cldn4 protein was significantly reduced （

＜0.05 or

＜0.01）.

Conclusion

QHD can alleviate the injury of esophageal mucosa in RE rats， and has a synergistic effect when used together with rabeprazole + mosapride. The underlying mechanism may be related to the inhibition of LPS/TLR4/NF-κB pathway， reduction of esophageal inflammation and enhancement of esophageal epithelial barrier function.

关键词

Keywords

references

RICHTER JE ， RUBENSTEIN JH . Presentation and epidemiology of gastroesophageal reflux disease ［J］. Gastroenterology ， 2018 ， 154 （ 2 ）： 267 - 276 .

中华医学会消化病学分会 . 2020年中国胃食管反流病专家共识［J］. 中华消化杂志， 2020 ， 40 （ 10 ）： 649 - 663 .

SANDHU DS ， FASS R . Current trends in the management of gastroesophageal reflux disease ［J］. Gut Liver ， 2018 ， 12 （ 1 ）： 7 - 16 .

陈静，曹正民，徐蕾，等 . 中医药治疗反流性食管炎作用机制研究进展［J］. 中华中医药学刊， 2022 ， 40 （ 7 ）： 177 - 181 .

罗樱 . 清郁和降汤联合奥美拉唑治疗肝胃郁热型非糜烂性反流病的临床观察［D］. 武汉：湖北中医药大学， 2017 .

李培彩，唐艳萍 . 胃食管反流病与消化道微生态关系的研究进展［J］. 国际消化病杂志， 2020 ， 40 （ 3 ）： 153 - 156 .

张园，彭伯坚，骆凤娇 . 菌群变化及脂多糖对胃食管反流病和Barrett食管的影响［J］. 广东医学， 2015 ， 36 （ 11 ）： 1773 - 1775 .

房渝，黄春，温剑虎，等 . NF-κB信号通路的激活在胃食管反流破坏食管黏膜上皮屏障功能机制中的作用［J］. 重庆医科大学学报， 2017 ， 42 （ 9 ）： 1119 - 1125 .

MASUDA T ， YANO F ， OMURA N ， et al . Effect of low-dose aspirin on chronic acid reflux esophagitis in rats ［J］. Dig Dis Sci ， 2018 ， 63 （ 1 ）： 72 - 80 .

段冰霞，陈宏慈，徐安，等 . 食管宁复方中药汤剂对反流性食管炎的治疗效果：大鼠模型研究［J］. 中华老年多器官疾病杂志， 2021 ， 20 （ 8 ）： 615 - 620 .

陆星华，张泰昌 . 反流性食管炎诊断及治疗指南（2003年）［J］. 中华消化内镜杂志， 2004 ， 21 （ 4 ）： 4 - 5 .

樊帅珂，方晓艳，朱正望，等 . 基于中西医临床病症特点的反流性食管炎动物模型分析［J］. 中国中医基础医学杂志， 2021 ， 27 （ 9 ）： 1395 - 1398 .

刘琰，唐艳萍，刘磊，等 . 活血通降方对反流性食管炎模型大鼠食管动力、血清炎症因子及食管下括约肌SCF/c-kit信号通路的影响［J］. 中医杂志， 2022 ， 63 （ 03 ）： 269 - 275 .

王鑫国 . 中药药理学实验教程［M］. 2版 . 北京：中国中医药出版社， 2017 ： 8 .

DESHPANDE NP ， RIORDAN SM ， CASTAÑO-RODRÍGUEZ N ， et al . Signatures within the esophageal microbiome are associated with host genetics， age， and disease ［J］. Microbiome ， 2018 ， 6 （ 1 ）： 227 .

BLACKETT KL ， SIDDHI SS ， CLEARY S ， et al . Oesophageal bacterial biofilm changes in gastro-oesophageal reflux disease， Barrett's and oesophageal carcinoma： association or causality？［J］. Aliment Pharmacol Ther ， 2013 ， 37 （ 11 ）： 1084 - 1092 .

CORNING B ， COPLAND AP ， FRYE JW . The esophageal microbiome in health and disease ［J］. Curr Gastroenterol Rep ， 2018 ， 20 （ 8 ）： 39 .

LV J ， GUO L ， LIU JJ ， et al . Alteration of the esophageal microbiota in Barrett's esophagus and esophageal adenocarcinoma ［J］. World J Gastroenterol ， 2019 ， 25 （ 18 ）： 2149 - 2161 .

BLEVINS CH ， IYER PG ， VELA MF ， et al . The esophageal epithelial barrier in health and disease ［J］. Clin Gastroenterol Hepatol ， 2018 ， 16 （ 5 ）： 608 - 617 .

ORLANDO RC . Pathophysiology of gastroesophageal reflux disease ［J］. J Clin Gastroenterol ， 2008 ， 42 （ 5 ）： 584 - 588 .

SOUZA RF ， HUO X ， MITTAL V ， et al . Gastroesophageal reflux might cause esophagitis through a cytokine-mediated mechanism rather than caustic acid injury ［J］. Gastroenterology ， 2009 ， 137 （ 5 ）： 1776 - 1784 .

YU HX ， WANG XL ， ZHANG LN ， et al . Involvement of the TLR4/NF-κB signaling pathway in the repair of esophageal mucosa injury in rats with gastroesophageal reflux disease ［J］. Cell Physiol Biochem ， 2018 ， 51 （ 4 ）： 1645 - 1657 .

YIN XL ， ZHONG L ， LIN CY ， et al . Tojapride reverses esophageal epithelial inflammatory responses on reflux esophagitis model rats ［J］. Chin J Integr Med ， 2021 ， 27 （ 8 ）： 604 - 612 .

MELONI M ， BURATTI P ， CARRIERO F ， et al . In vitro modelling of barrier impairment associated with gastro-oesophageal reflux disease（GERD）［J］. Clin Exp Gastroenterol ， 2021 ， 14 ： 361 - 373 . doi： 10.2147/CEG.S325346 http://dx.doi.org/10.2147/CEG.S325346 .

谢璟仪 . 基于Nrf2介导NF-κB通路探讨健脾清化颗粒调控食管黏膜炎症性损伤机制［D］. 北京：北京中医药大学， 2020 .

AL-SADI R ， YE D ， SAID HM ， et al . IL-1beta-induced increase in intestinal epithelial tight junction permeability is mediated by MEKK-1 activation of canonical NF-kappaB pathway ［J］. Am J Pathol ， 2010 ， 177 （ 5 ）： 2310 - 2322 .

SUZUKI T ， YOSHINAGA N ， TANABE S . Interleukin-6 （IL-6） regulates claudin-2 expression and tight junction permeability in intestinal epithelium ［J］. J Biol Chem ， 2011 ， 286 （ 36 ）： 31263 - 31271 .

VAN ITALLIE CM ， ANDERSON JM . Claudins and epithelial paracellular transport ［J］. Annu Rev Physiol ， 2006 ， 68 ： 403 - 429 . doi： 10.1146/annurev.physiol. 68. 040104.131404 http://dx.doi.org/10.1146/annurev.physiol.68.040104.131404 .

WILL C ， FROMM M ， MULLER D . Claudin tight junction proteins： novel aspects in paracellular transport ［J］. Perit Dial Int ， 2008 ， 28 （ 6 ）： 577 - 584 .

LIU F ， KOVAL M ， RANGANATHAN S ， et al . Systems proteomics view of the endogenous human claudin protein family ［J］. J Proteome Res ， 2016 ， 15 （ 2 ）： 339 - 359 .

查看原文

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

运用通法辨治反流性食管炎经验

基于文献的胃食管反流病不同亚型动物模型构建方法的分析

抑肝扶脾方对肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织AKT/mTOR通路的影响

针刺结合刺血拔罐对慢性自发性荨麻疹患者凝血-补体-肥大细胞活化轴相关因子表达的影响

香术防感方吸嗅与滴鼻给药方式预防甲型流感H1N1模型小鼠的药效学比较研究