二仙汤对迟发性抑郁症模型大鼠脑组织脉络丛叶酸转运-海马神经发生的影响

李兰心; 曾宁溪; 张天鸽; 严灿; 吴丽丽

doi:10.13288/j.11-2166/r.2024.10.012

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

二仙汤对迟发性抑郁症模型大鼠脑组织脉络丛叶酸转运-海马神经发生的影响

实验研究 | 更新时间：2024-05-13

- 二仙汤对迟发性抑郁症模型大鼠脑组织脉络丛叶酸转运-海马神经发生的影响
- Effects of Erxian Decoction （二仙汤） on Choroid Plexus Folate Transport-Hippocampal Neurogenesis in Rat Brain Tissue of Late-Onset Depression Model
- 中医杂志 2024年65卷第10期页码：1046-1055
- 作者机构：
  
  1.广州中医药大学中西医结合基础研究中心，广东省广州市番禺区大学城外环东路232号，510006
  2.深圳市龙华区人民医院
- 作者简介：
  
  wulili@gzucm.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金(81774102;82174255)
- DOI：10.13288/j.11-2166/r.2024.10.012
  中图分类号：
- 收稿：2023-10-29，
  
  修回：2024-03-05，
  
  纸质出版：2024-05-17
- 稿件说明：
移动端阅览
李兰心,曾宁溪,张天鸽等.二仙汤对迟发性抑郁症模型大鼠脑组织脉络丛叶酸转运-海马神经发生的影响[J].中医杂志,2024,65(10):1046-1055.

LI Lanxin,ZENG Ningxi,ZHANG Tiange,et al.Effects of Erxian Decoction （二仙汤） on Choroid Plexus Folate Transport-Hippocampal Neurogenesis in Rat Brain Tissue of Late-Onset Depression Model[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2024,65(10):1046-1055.
李兰心,曾宁溪,张天鸽等.二仙汤对迟发性抑郁症模型大鼠脑组织脉络丛叶酸转运-海马神经发生的影响[J].中医杂志,2024,65(10):1046-1055. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2024.10.012.

LI Lanxin,ZENG Ningxi,ZHANG Tiange,et al.Effects of Erxian Decoction （二仙汤） on Choroid Plexus Folate Transport-Hippocampal Neurogenesis in Rat Brain Tissue of Late-Onset Depression Model[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2024,65(10):1046-1055. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2024.10.012.

摘要

目的

探讨二仙汤治疗迟发性抑郁症（LOD）的效果及可能作用机制。

方法

40只雄性7~8周龄Wistar大鼠分为正常组和青年抑郁组各20只。60只20月龄雄性Wistar大鼠分为衰老组、迟发抑郁组、二仙汤组各20只。青年抑郁组大鼠采用慢性不可预计应激刺激（CUMS）6周建立抑郁模型，迟发抑郁组、二仙汤组衰老大鼠采用CUMS 6周建立LOD模型，正常组和衰老组不进行任何干预。造模的同时进行灌胃给药，二仙汤组大鼠给予二仙汤8 g/（kg·d）灌胃，正常组、青年抑郁组、衰老组、迟发抑郁组给予4 ml/（kg·d）纯净水灌胃，各组均给药6周。采用糖水偏爱实验、强迫游泳实验评估大鼠抑郁样行为，旷场实验评价大鼠自发活动能力，T迷宫实验评估大鼠认知功能；Western Blot法检测海马组织神经元核心抗原（NeuN）、巢蛋白、双皮质素（DCX）及脉络丛组织中闭锁小带蛋白1（ZO-1）、叶酸α受体（FRα）、还原型叶酸转运体（RFC）、质子耦合叶酸转运体（PCFT）蛋白表达；采用免疫荧光法检测海马齿状回Ki-67/巢蛋白双阳性细胞数、5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）/DCX双阳性细胞数及脉络丛组织中ZO-1、FRα、RFC、PCFT蛋白表达；ELISA法检测血浆、脑脊液、海马组织中5-甲基四氢叶酸（5-MTHF）含量；采用Pearson相关分析对各组大鼠脑脊液、海马组织中5-MTHF含量与海马组织中巢蛋白、DCX、NeuN蛋白表达进行相关性分析。

结果

与正常组比较，青年抑郁组及迟发抑郁组大鼠糖水偏爱度降低，旷场总路程、穿格次数减少，强迫游泳不动时间延长，海马组织NeuN、巢蛋白、DCX蛋白表达均降低，海马齿状回Ki-67/巢蛋白双阳性细胞数、BrdU/DCX双阳性细胞数减少，ZO-1、FRα蛋白表达及荧光强度减少（

＜0.05或

＜0.01）；青年抑郁组大鼠第3、4天及迟发抑郁组大鼠第2~4天T迷宫正确率均明显降低，迟发抑郁组大鼠脑脊液、海马组织中5-MTHF含量明显降低（

＜0.05或

＜0.01）。与青年抑郁组相比，迟发抑郁组大鼠旷场总路程、穿格次数减少，第1~4天T迷宫正确率均显著降低，海马组织NeuN、巢蛋白、DCX蛋白表达及海马齿状回Ki-67/巢蛋白双阳性细胞数、BrdU/DCX双阳性细胞数减少（

＜0.05或

＜0.01）。与迟发抑郁组比较，二仙汤组大鼠糖水偏爱度及旷场总路程、穿格次数均升高，强迫游泳不动时间缩短，第3~4天T迷宫正确率明显升高，海马组织NeuN、巢蛋白、DCX蛋白表达升高，海马齿状回Ki-67/巢蛋白双阳性细胞数、BrdU/DCX双阳性细胞数增加，脑脊液、海马组织中5-MTHF含量明显升高，脉络丛中ZO-1、FRα、RFC、PCFT蛋白表达及荧光强度升高（

＜0.05或

＜0.01）。相关性分析结果显示，脑脊液（

=0.466）和海马组织（

=0.522）中5-MTHF含量与海马组织中巢蛋白表达存在正相关（

＜0.05）。

结论

二仙汤可改善LOD模型大鼠抑郁样行为及认知障碍，其机制可能通过减轻脑组织脉络丛结构损伤，改善脉络丛叶酸转运障碍，从而促进海马神经发生。

Abstract

Objective

This study aims to investigate the effectiveness and potential mechanism of

Erxian Decoction

（二仙汤） for late-onset depression （LOD）.

Methods

Forty Wistar male rats of 7

8 weeks were divided into 20 each of normal group and youth depression group. Sixty Wistar male rats of 20 months were divided into 20 each of elder group， LOD group and

Erxian Decoction

group. The rats in youth depression group were modelled with chronic unpredictable mild stress （CUMS） for 6 weeks to build a depression model， and the elder rats in LOD group and

Erxian Decoction

group were modelled with CUMS for 6 weeks to build a LOD model， with no interventions in the normal group and the elder group. Gastric administration was carried out at the same time of modelling， rats in

Erxian Decoction

group were given 8 g/（kg·d） of

Erxian Decoction

by gavage， and rats in the normal group， youth depression group， elder group， and LOD group were given 4 ml/（kg·d） of pure water by gavage， for 6 weeks in each group. Sugar water preference experiment and forced swimming experiment were used to evaluate the depression-like behaviour of rats， absent field experiment was used to evaluate the spontaneous activity ability of rats， and T-maze experiment was used to evaluate the cognitive function of rats； Western blot assay was used to detect neuronal nuclei （NeuN）， nestin， doublecortin （DCX） in hippocampal tissue， and zonula occludens-l （ZO-1）， folate receptor α （FRα）， reduced folate carrier （RFC）， and protoncoupledfolate transporter （PCFT） protein expression in choroid plexus； immunofluorescence was used to detect the number of double-positive cells for Ki-67/nestin， the number of double-positive cells for 5-bromodeoxyuracil nucleoside （BrdU）/DCX in hippocampal dentate gyrus， and the protein expression of ZO-1， FRα， RFC， and PCFT in choroid plexus tissues； ELISA technique was used to detect plasma， cerebrospinal fluid， 5-methyltetrahydrofolate （5-MTHF） in hippocampal tissues； Pearson correlation analysis was used to correlate the 5-MTHF content in cerebrospinal fluid and hippocampal tissues and the expression of nestin， DCX， and NeuN proteins in hippocampal tissues of rats in youth depression group and LOD group.

Results

Compared with normal group， rats in youth depression group and LOD group showed reduced sugar water preference， reduced total distance travelled in the absent field， reduced number of times through the grid， prolonged forced swimming immobilisation， reduced hippocampal NeuN， nestin and DCX protein expression， reduced number of Ki-67/nestin double-positive cells in hippocampal dentate gyrus， reduced number of BrdU/DCX double-positive cells in hippocampal dentate gyrus， and reduced expression of ZO-1 and FRα proteins and fluorescence intensity （

＜0.05 or

＜0.01）； the c

orrect rate of T-maze on days 3 and 4 in the rats of youth depression group and on days 2 to 4 in the rats of LOD group significantly decreased， and the content of 5-MTHF in the cerebrospinal fluid and hippocampal tissues of the rats of LOD group significantly decreased as well （

＜0.05 or

＜0.01）. Compared with youth depression group， rats in LOD group showed a decrease in total distance travelled in absenteeism， number of times through the grid， a significant decrease in the correct rate of the T-maze on day 1

4， a decrease in NeuN， nestin， DCX protein expression of hippocampal tissue and the number of Ki-67/nestin double-positive cells， BrdU/DCX double-positive cells of hippocampal dentate gyrus （

＜0.05 or

＜0.01）. Compared with LOD group， rats in

Erxian Decoction

group had elevated sugar-water preference and total distance travelled in absenteeism and number of times through the grid， shorter forced swimming immobility time， significantly higher correct rate of the T-maze on day 3-4， elevated expression of NeuN， nestin， and DCX proteins in hippocampal tissues， increased number of Ki-67/nestin double-positive cells and BrdU/DCX double-positive cells in hippocampal dentate gyrus， and increased 5-MTHF content in cerebrospinal fluid and hippocampal， and ZO-1， FRα， RFC， PCFT protein expression and fluorescence intensity increased in choroid plexus （

＜0.05 or

＜0.01）. Correlation analysis showed that there was a positive correlation between 5-MTHF content in cerebrospinal fluid （

= 0.466）， hippocampal tissue （

= 0.522） and nestin expression in hippocampal tissue （

＜0.05）.

Conclusion

Erxian Decoction

could improve depressive-like behaviour and cognitive impairment in LOD model rats， and its mechanism may promote hippocampal neurogenesis by alleviating structural damage to the choroid plex

us of the brain tissue， and improving impaired choroid plexus folate transport.

关键词

Keywords

references

吕永良，吴爱勤，李鸣，等 . 老年抑郁症的心理社会因素研究［J］. 中国心理卫生杂志， 2004 ， 18 （ 4 ）： 254 - 256，261 .

LLOYD AJ ， FERRIER IN ， BARBER R ， et al . Hippocampal volume change in depression： late- and early-onset illness compared ［J］. Br J Psychiatry ， 2004 ， 184 ： 488 - 495 . doi： 10.1192/bjp.184.6.488 http://dx.doi.org/10.1192/bjp.184.6.488 .

TERRACCIANO A ， BILGEL M ， ASCHWANDEN D ， et al . Personality associations with amyloid and tau： results from the baltimore longitudinal study of aging and meta-analysis ［J］. Biol Psychiatry ， 2022 ， 91 （ 4 ）： 359 - 369 .

ALTHUBAITY N ， SCHUBERT J ， MARTINS D ， et al . Choroid plexus enlargement is associated with neuroinflammation and reduction of blood brain barrier permeability in depression ［J］. Neuroimage Clin ， 2022 ， 33 ： 102926 . doi： 10.1016/j.nicl.2021.102926 http://dx.doi.org/10.1016/j.nicl.2021.102926 .

BRUNO D ， REICHERT PLASKA C ， CLARK DPA ， et al . CSF alpha-synuclein correlates with CSF neurogranin in late-life depression ［J］. Int J Neurosci ， 2021 ， 131 （ 4 ）： 357 - 361 .

KIM JM ， STEWART R ， KIM SW ， et al . Predictive value of folate， Vitamin B12 and homocysteine levels in late-life depression ［J］. Br J Psychiatry ， 2008 ， 192 （ 4 ）： 268 - 274 .

薛娟，马文斌，涂华，等 . 不同人群抑郁症特点和叶酸干预的研究进展［J］. 中国当代医药， 2022 ， 29 （ 16 ）： 53 - 56 .

牛婕，严灿，吴丽丽 . 补肾法抗晚发型抑郁症研究的新视角：脉络丛衰老-叶酸脑转运-海马神经发生-认知功能［J］. 中国中西医结合杂志， 2019 ， 39 （ 7 ）： 868 - 871 .

马学玉 . 二仙汤治疗更年期抑郁症16例［J］. 陕西中医， 2002 ， 23 （ 5 ）： 438 - 439 .

李光义 . 加味二仙汤治疗更年期抑郁症的临床研究［D］. 济南：山东中医药大学， 2014 .

罗武龙，陈洁，牛婕等 . 基于网络药理学的二仙汤治疗抑郁症的作用机制研究［J］. 中国药理学通报， 2020 ， 36 （ 9 ）： 1317 - 1324 .

HUANG YL ， ZENG NX ， CHEN J ， et al . Dynamic changes of behaviors， dentate gyrus neurogenesis and hippocampal miR-124 expression in rats with depression induced by chronic unpredictable mild stress ［J］. Neural Regen Res ， 2020 ， 15 （ 6 ）： 1150 - 1159 .

KATZ RJ . Animal model of depression： pharmacological sensitivity of a hedonic deficit ［J］. Pharmacol Biochem Behav ， 1982 ， 16 （ 6 ）： 965 - 968 .

WILLNER P . Validity， reliability and utility of the chronic mild stress model of depression： a 10-year review and evaluation ［J］. Psychopharmacology （Berl）， 1997 ， 134 （ 4 ）： 319 - 329 .

赵伟，孙国志 . 不同种实验动物间用药量换算［J］. 畜牧兽医科技信息， 2010 （ 5 ）： 54 - 55 .

张玉龙，吴世伟，颜明辉，等 . 探讨老年期抑郁症的中医病机和治疗原则［J］. 中国中医基础医学杂志， 2020 ， 26 （ 3 ）： 315 - 317，384 .

王越，丁元庆，张成博 . 老年期抑郁症病机探讨与常见证候分析［J］. 时珍国医国药， 2018 ， 29 （ 4 ）： 942 - 943 .

薛丽飞 . 老年抑郁症证候与中医体质相关性研究［D］. 广州：广州中医药大学， 2011 .

程坤，张军平 . 阮士怡辨治老年抑郁症经验［J］. 中医杂志， 2017 ， 58 （ 13 ）： 1097 - 1099 .

ROESKE MJ ， KONRADI C ， HECKERS S ， et al . Hippocampal volume and hippocampal neuron density， number and size in schizophrenia： a systematic review and meta-analysis of postmortem studies ［J］. Mol Psychiatry ， 2021 ， 26 （ 7 ）： 3524 - 3535 .

MULLEN RJ ， BUCK CR ， SMITH AM . NeuN， a neuronal specific nuclear protein in vertebrates ［J］. Development ， 1992 ， 116 （ 1 ）： 201 - 211 .

VIDEBECH P ， RAVNKILDE B . Hippocampal volume and depression： a meta-analysis of MRI studies ［J］. Am J Psychiatry ， 2004 ， 161 （ 11 ）： 1957 - 1966 .

牟君，谢鹏 . 海马神经发生障碍：抑郁症发病机制的新观念［J］. 第三军医大学学报， 2006 ， 28 （ 11 ）： 1264 - 1266 .

FRIMODT-MØLLER KE ， MØLLEGAARD JEPSEN JR ， FELDT-RASMUSSEN U ， et al . Hippocampal volume， cognitive functions， depression， anxiety， and quality of life in patients with cushing syndrome ［J］. J Clin Endocrinol Metab ， 2019 ， 104 （ 10 ）： 4563 - 4577 .

GEERLINGS MI ， GERRITSEN L . Late-life depression， hippocampal volumes， and hypothalamic-pituitary-adrenal axis regulation： a systematic review and meta-analysis ［J］. Biol Psychiatry ， 2017 ， 82 （ 5 ）： 339 - 350 .

GAO J ， WU Y ， HE D ， et al . Anti-aging effects of Ribes meyeri anthocyanins on neural stem cells and aging mice ［J］. Aging （Albany NY）， 2020 ， 12 （ 17 ）： 17738 - 17753 .

郑志竑，林玲，胡建石，等 . 大鼠脑的神经干细胞的体外培养、增殖和分化［J］. 神经解剖学杂志， 2003 ， 19 （ 1 ）： 33 - 36 .

RUTJES AW ， DENTON DA ， DI NISIO M ， et al . Vitamin and mineral supplementation for maintaining cognitive function in cognitively healthy people in mid and late life ［J］. Cochrane Database Syst Rev ， 2018 ， 12 （ 12 ）： CD011906 .

HAWKINS BT ， DAVIS TP . The blood-brain barrier/neurovascular unit in health and disease ［J］. Pharmacol Rev ， 2005 ， 57 （ 2 ）： 173 - 185 .

刘君丽，敬海明，李国君 . 脑脉络丛组织的连接蛋白、转运蛋白及其药理毒理学研究进展［J］. 中国药理学与毒理学杂志， 2012 ， 26 （ 1 ）： 120 - 126 .

查看原文

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

通络扶正汤辅助治疗对缺血性脑卒中急性期风痰瘀阻证患者凝血功能和血管内皮功能的影响

加味涤痰汤对慢性间歇低氧模型大鼠认知功能及大脑静息态功能磁共振成像的影响

通脑益智方对非痴呆型血管性认知障碍脾肾亏虚、痰瘀阻络证患者认知功能及肠道菌群的影响

太极拳辅助治疗对轻中度慢性阻塞性肺疾病患者疼痛、认知功能及大脑静息态脑功能的影响

银杏叶胶囊联合阿立哌唑对精神分裂症患者认知功能的影响