更欣汤对围绝经期失眠模型小鼠下丘脑结节状乳头体核雌激素受体和食欲素A的影响

李修恒; 汤玲; 孙天琳; 孙晓卉

doi:10.13288/j.11-2166/r.2024.23.013

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更欣汤对围绝经期失眠模型小鼠下丘脑结节状乳头体核雌激素受体和食欲素A的影响

实验研究 | 更新时间：2024-11-25

- 更欣汤对围绝经期失眠模型小鼠下丘脑结节状乳头体核雌激素受体和食欲素A的影响
- Effects of Gengxin Decoction （更欣汤） on Oestrogen Receptors and Orexin A in the Nucleus Accumbens of the Hypothalamus Nodularis Papillaris in Perimenopausal Insomnia Model Mice
- 中医杂志 2024年65卷第23期页码：2461-2467
- 作者机构：
  
  1.北京中医药大学东直门医院，北京市东城区海运仓5号，100700
  2.北京中医药大学第三附属医院
  3.北京市第一中西医结合医院
- 作者简介：
  
  tangling73@126.com
- 基金信息：
  
  中国民族医药学会科研项目(2021Z1225-340102);北京市中医管理局名医传承、薪火“3+3”工程（JB049）
- DOI：10.13288/j.11-2166/r.2024.23.013
  中图分类号：
- 收稿：2024-05-26，
  
  修回：2024-08-30，
  
  纸质出版：2024-12-02
- 稿件说明：
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李修恒,汤玲,孙天琳等.更欣汤对围绝经期失眠模型小鼠下丘脑结节状乳头体核雌激素受体和食欲素A的影响[J].中医杂志,2024,65(23):2461-2467.

LI Xiuheng,TANG Ling,SUN Tianlin,et al.Effects of Gengxin Decoction （更欣汤） on Oestrogen Receptors and Orexin A in the Nucleus Accumbens of the Hypothalamus Nodularis Papillaris in Perimenopausal Insomnia Model Mice[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2024,65(23):2461-2467.
李修恒,汤玲,孙天琳等.更欣汤对围绝经期失眠模型小鼠下丘脑结节状乳头体核雌激素受体和食欲素A的影响[J].中医杂志,2024,65(23):2461-2467. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2024.23.013.

LI Xiuheng,TANG Ling,SUN Tianlin,et al.Effects of Gengxin Decoction （更欣汤） on Oestrogen Receptors and Orexin A in the Nucleus Accumbens of the Hypothalamus Nodularis Papillaris in Perimenopausal Insomnia Model Mice[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2024,65(23):2461-2467. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2024.23.013.

摘要

目的

从下丘脑结节状乳头体核（TMN）雌激素受体和食欲素A（OXA）表达的角度探究更欣汤治疗围绝经期失眠的可能作用机制。

方法

选取动情周期规律的雌性ICR小鼠，应用4-乙烯基环己烯二环氧化物（VCD）联合对氯苯丙氨酸（PCPA）混悬液腹腔注射建立围绝经期失眠小鼠模型。造模成功的75只小鼠随机分为模型组、佐必克隆组及更欣汤低、中、高剂量组，每组15只，另设正常小鼠15只为空白组。造模成功后次日，更欣汤低、中、高剂量组小鼠每日9：00分别给予更新汤颗粒1.15、2.3、4.6 g·kg

-1

·d

-1

灌胃，佐匹克隆组小鼠同时间点给予佐匹克隆混悬液1.13 mg·kg

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·d

-1

灌胃，空白组、模型组小鼠同时间点予蒸馏水1 ml·kg

-1

·d

-1

灌胃，各组均连续14天。实验期间观察各组小鼠日间活动、精神状态、饮食、毛色等一般情况；末次干预24 h后，采用戊巴比妥钠协同试验检测小鼠睡眠潜伏期及睡眠持续期，ELISA法检测小鼠血清雌二醇（E

）、孕酮（P）、促卵泡生成激素（FSH）以及下丘脑TMN区OXA水平，免疫荧光染色法检测小鼠TMN区雌激素受体α（ERα）、OXA、雌激素受体β（ERβ）蛋白光密度值。

结果

空白组小鼠昼夜节律正常；模型组小鼠昼夜节律紊乱，白天和晚上保持活跃；更欣汤各组小鼠精神状态较前改善，小鼠精神状态明显好转，白天活动较前减少，毛色稍黄、但有光泽，尤以更欣汤中剂量组最明显；佐匹克隆组白天活动较前减少，毛发粗糙少光泽，警觉性高。与空白组比较，模型组小鼠睡眠潜伏期延长，睡眠持续期缩短，血清E

、P水平降低，血清FSH和TMN区OXA蛋白表达增加，TMN区ERα、ERβ光密度值减少，OXA光密度值增加（

＜0.05或

＜0.01）。与模型组比较，更欣汤低、中、高剂量组和佐匹克隆组小鼠睡眠潜伏期缩短，睡眠持续期延长（

＜0.01）；更欣汤中、高剂量组血清E

、P水平升高，FSH及TMN区OXA水平降低（

＜0.05）；更欣汤中剂量组小鼠TMN区ERα光密度值增加，更欣汤低、中剂量组和佐匹克隆组OXA光密度值减少，更欣汤低、中、高剂量组和佐匹克隆组小鼠TMN区ERβ光密度值增加（

＜0.05）。与佐匹克隆组比较，更欣汤低剂量组小鼠睡眠潜伏期时间延长、睡眠持续时间缩短，更欣汤中、高剂量组血清E

水平及TMN区ERβ光密度值升高、血清FSH及TMN区OXA水平降低（

＜0

.05）。与更欣汤低剂量组比较，更欣汤中、高剂量组小鼠睡眠潜伏期缩短，血清FSH水平降低（

＜0.01）。

结论

更欣汤可能通过调控TMN区雌激素受体和OXA分布，抑制TMN区食欲素系统过度激活，从而抑制觉醒、改善围绝经期失眠。

Abstract

Objective

To explore the possible mechanism of

Gengxin Decoction

（更欣汤） in the treatment of perimenopausal insomnia from the perspective of the expression of oestrogen receptor and orexin A （OXA） in hypothalamic tuberomammillary nucleus （TMN）.

Methods

Female ICR mice with regular estrous cycle were selected to establish perimenopausal insomnia mice models by injecting 4-vinylcyclohexene diepoxide （VCD） combined with para-chlorophenylalanine （PCPA） suspension intraperitoneally. After successful modeling， 75 mice models were randomly divided into model group， zopiclone group and low-， middle-， and high-dose

Gengxin Decoction

， with 15 mice in each group， and 15 normal mice were set as blank group. On the next day after successful modelling， mice in the low-， middle-， and high-dose

Gengxin Decoction

were given

Gengxin Decoction

granules 1.15， 2.3 and 4.6 g·kg

-1

·d

-1

by gavage at 9：00 AM every day， mice in the zopiclone group were given zopiclone suspension 1.13 mg·kg

-1

·d

-1

by gavage at the same time point， and mice in the blank and model groups were given distilled water 1 ml·kg

-1

·d

-1

by gavage at the same time point， for 14 days in all groups. During the experimental period， general conditions of the mice in each group， such as daytime activities， mental state， diet and coat colour， were observed； twenty-four hours after the final intervention， the sleep latency and sleep duration of mice were detected by sodium pentobarbital synergy test， and the levels of serum estradiol （E

）、progesterone （P）、follicle stimulating hormone （FSH） and OXA protein in TMN of hypothalamus were detected by ELIS

A， and the protein optical density values of estrogen receptor α （ERα）， OXA and ERβ in TMN was detected by immunofluorescence staining.

Results

The circadian rhythm of mice was regular in the blank group； the circadian rhythm of mice was disordered in the model group， and they remained active during the day and night； the mental state of mice in each group of

Gengxin Decoction

was improved compared with that before， which showed that the daytime activity was less than before， and the coat color was slightly yellow but shiny， and the mental state of mice was significantly improved in the middle-dose

Gengxin Decoction

； the zopiclone group was less active during the day than before， had rough， less shiny hair， and was more alert. Compared with the blank group， the sleep latency of mice in the model group prolonged， the sleep duration shortened， serum E

and P decreased， serum FSH and the expression of OXA protein in TMN region increased， the optical density of ERα and ERβ in TMN region decreased， and the optical density of OXA increased （

＜0.05 or

＜0.01）. Compared with the model group， the sleep latency of the mice in the low-， middle-， and high-dose

Gengxin Decoction

groups and the zopiclone group shortened， the sleep duration prolonged （

＜0.01）； the serum E

and P in the middle-， and high-dose

Gengxin Decoction

groups increased， FSH and the expression of OXA protein in TMN area decreased （

＜0.05）； the optical density values of ERα in TMN area increased in the medium-dose group， and the optical density value of OXA decreased in low- and middle-dose

Gengxin Decoction

groups， and the optical density values of ERβ in TMN area increased in low-， middle-， and high-dose

Gengxin Decoction

groups and the zopiclone group （

＜0.05 ）. Compared with the zopiclone group， mice in the low-dose

Gengxin Decoction

group had longer sleep latency and shorter sleep duration， and mice in the middle- and high-dose

Gengxin Decoction

groups had higher serum E

level and ERβ optical density value in the TMN area， and lower serum FSH and OXA level in the TMN area （

＜0.05）. Compared with the low-dose

Gengxin Decoction

group， the sleep latency of mice in the middle- and high-dose

Gengxin Decoction

groups shortened， and the serum FSH level reduced （

＜0.01）.

Conclusion

Gengxin Decoction

may inhibit arousal and improve perimenopausal insomnia by modulating the distribution of estrogen receptors and OXA in the TMN region， and inhibiting the overactivation of the orexin system in the TMN region.

关键词

Keywords

references

谢幸，孔北华，段涛．妇产科学［Ｍ］．９版．北京：人民卫生出版社，2018： 353 - 356 .

中华预防医学会更年期保健分会，中国人体健康科技促进会妇科内分泌和生育力促进专委会，北京中西医结合学会更年期专业委员会，等 . 绝经相关失眠临床管理中国专家共识［J］. 中国全科医学， 2023 ， 26 （ 24 ）： 2951 - 2958 .

贾林娜，汤玲，刘琼洁，等 . 更欣汤治疗心肾不交型围绝经期失眠症的临床疗效研究［J］. 世界中医药， 2023 ， 18 （ 6 ）： 839 - 843 .

贾林娜，汤玲，肖承悰 . 肖承悰自拟更欣汤治疗女性更年期失眠症经验［J］. 中医杂志， 2020 ， 61 （ 6 ）： 479 - 481 .

王艺璇，汤玲，孙天琳，等 . 更欣汤对围绝经期失眠模型大鼠血清雌激素水平及下丘脑雌激素受体的影响［J］. 中华中医药杂志， 2024 ， 39 （ 1 ）： 147 - 151 .

HAAS H ， PANULA P . The role of histamine and the tuberomammillary nucleus in the nervous system ［J］. Nat Rev Neurosci ， 2003 ， 4 （ 2 ）： 121 - 130 .

MARCUS JN ， ASCHKENASI CJ ， LEE CE ， et al . Differential expression of orexin receptors 1 and 2 in the rat brain ［J］. J Comp Neurol ， 2001 ， 435 （ 1 ）： 6 - 25 .

ISHUNINA TA ， KAMPHORST W ， SWAAB DF . Changes in metabolic activity and estrogen receptors in the human medial mamillary nucleus： relation to sex， aging and Alzheimer's disease ［J］. Neurobiol Aging ， 2003 ， 24 （ 6 ）： 817 - 828 .

WILLIE JT ， CHEMELLI RM ， SINTON CM ， et al . To eat or to sleep？ Orexin in the regulation of feeding and wakefulness ［J］. Annu Rev Neurosci ， 2001 ， 24 （ 1 ）： 429 - 458 .

FEDERICI LM ， CALIMAN IF ， MOLOSH AI ， et al . Hypothalamic orexin's role in exacerbated cutaneous vasodilation responses to an anxiogenic stimulus in a surgical menopause model ［J］. Psychoneuroendocrinology ， 2016 ， 65 ： 127 - 137 . doi： 10.1016/j.psyneuen.2015.12.011 http://dx.doi.org/10.1016/j.psyneuen.2015.12.011 .

杜纳纳，许丹丹，黄莉莉 . 去卵巢和性成熟期ICR雌性小鼠动情周期的观察［J］. 中国病理生理杂志， 2015 ， 31 （ 12 ）： 2301 - 2304 .

LOHFF JC ， CHRISTIAN PJ ， MARION SL ， et al . Characterization of cyclicity and hormonal profile with impending ovarian failure in a novel chemical-induced mouse model of perimenopause ［J］. Comp Med ， 2005 ， 55 （ 6 ）： 523 - 527 .

李珊珊，李翔，柯碧莲，等 . 高脂饮食结合VCD药物诱导围绝经期肥胖小鼠模型的研究［J］. 世界科学技术-中医药现代化， 2022 ， 24 （ 6 ）： 2172 - 2178 .

ZHONG Y ， ZHENG Q ， HU P ， et al . Sedative and hypnotic effects of compound Anshen essential oil inhalation for insomnia ［J］. BMC Complement Altern Med ， 2019 ， 19 （ 1 ）： 306 .

张林挺 . 酸枣仁汤对虚劳失眠大鼠干预机理的研究［D］. 广州：广州中医药大学， 2009 .

徐叔云，卞如濓，陈修 . 药理实验方法学［M］. 3版 . 北京：人民卫生出版社， 2002 ： 202 - 204 .

刘影 . 大麻二酚配伍褪黑素改善大、小鼠失眠和昼夜节律紊乱的作用及机制研究［D］. 烟台：烟台大学， 2023 .

李修恒，汤玲，闫清雅，等 . 从“心阴虚热”病机变化探讨国医大师肖承悰治疗更年期失眠症经验［J］. 中国临床医生杂志， 2023 ， 51 （ 9 ）： 1130 - 1132 .

贾林娜 . 更欣汤治疗女性更年期失眠症（心肾不交型）的临床疗效评价［D］. 北京：北京中医药大学， 2021 .

LORENZON F ， SIMAS BB ， GREGORIO T ， et al . Ovarian failure induced by 4-vinylcyclohexene diepoxide worsens the autonomic cardiovascular response to chronic unpredictable stress in rats ［J］. Life Sci ， 2019 ， 226 ： 130 - 139 . doi： 10.1016/j.lfs.2019.04.007 http://dx.doi.org/10.1016/j.lfs.2019.04.007 .

ACOSTA JI ， MAYER L ， TALBOOM JS ， et al . Transitional versus surgical menopause in a rodent model： etiology of ovarian hormone loss impacts memory and the acetylcholine system ［J］. Endocrinology ， 2009 ， 150 （ 9 ）： 4248 - 4259 .

全世建，林杏娥，刘妮 . PCPA大鼠失眠模型的证候属性研究［J］. 中医药学刊， 2006 ， 24 （ 3 ）： 450 - 451 .

覃甘梅，覃骊兰 . 心肾不交型失眠动物模型研究进展［J］. 中华中医药杂志， 2018 ， 33 （ 1 ）： 229 - 231 .

刘天雅，洪宗元，曲卫敏，等 . 中枢组胺能神经系统调节睡眠-觉醒机制研究进展［J］. 药学学报， 2011 ， 46 （ 3 ）： 247 - 252 .

ZAKOWSKI W ， ZAWISTOWSKI P . Neurochemistry of the mammillary body ［J］. Brain Struct Funct ， 2023 ， 228 （ 6 ）： 1379 - 1398 .

YAMASHITA T ， YAMANAKA A . Lateral hypothalamic circuits for sleep-wake control ［J］. Curr Opin Neurobiol ， 2017 ， 44 ： 94 - 100 . doi： 10.1016/j.conb.2017.03.020 http://dx.doi.org/10.1016/j.conb.2017.03.020 .

HUANG ZL ， QU WM ， LI WD ， et al . Arousal effect of orexin A depends on activation of the histaminergic system ［J］. PNAS ， 2001 ， 98 （ 17 ）： 9965 - 9970 .

RUSSELL SH ， SMALL CJ ， KENNEDY AR ， et al . Orexin A interactions in the hypothalamo-pituitary gonadal axis ［J］. Endocrinology ， 2001 ， 142 （ 12 ）： 5294 - 5302 .

EL-SEDEEK M ， KORISH AA ， DEEF MM . Plasma orexin-A levels in postmenopausal women： possible interaction with estrogen and correlation with cardiovascular risk status ［J］. BJOG ， 2010 ， 117 （ 4 ）： 488 - 492 .

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