清热活血方对胶原诱导性关节炎模型大鼠H3K18la及JAK2/STAT3信号通路的影响

杨越; 张解玉; 张馨文; 魏光成; 石金杰; 李晓旭; 赵珈禾; 曹炜

doi:10.13288/j.11-2166/r.2025.19.013

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

清热活血方对胶原诱导性关节炎模型大鼠H3K18la及JAK2/STAT3信号通路的影响

实验研究 | 更新时间：2025-09-26

- 清热活血方对胶原诱导性关节炎模型大鼠H3K18la及JAK2/STAT3信号通路的影响
  增强出版
- Effects of Qingre Huoxue Formulation （清热活血方） on H3K18 Lactylation and the JAK2/STAT3 Signaling Pathway in Rats with Collagen-Induced Arthritis
- 中医杂志 2025年66卷第19期页码：2045-2051
- 作者机构：
  
  中国中医科学院望京医院，北京市朝阳区中环南路6号，100102
- 作者简介：
  
  academic_caowei66@163.com
- 基金信息：
  
  北京市自然科学基金(7242261);中国中医科学院望京医院高水平中医医院建设项目(WJCC-202317;WJCC-202321)
- DOI：10.13288/j.11-2166/r.2025.19.013
  中图分类号：
- 收稿：2025-03-11，
  
  修回：2025-06-24，
  
  纸质出版：2025-10-02
- 稿件说明：
移动端阅览
杨越,张解玉,张馨文等.清热活血方对胶原诱导性关节炎模型大鼠H3K18la及JAK2/STAT3信号通路的影响[J].中医杂志,2025,66(19):2045-2051.

YANG Yue,ZHANG Xieyu,ZHANG Xinwen,et al.Effects of Qingre Huoxue Formulation （清热活血方） on H3K18 Lactylation and the JAK2/STAT3 Signaling Pathway in Rats with Collagen-Induced Arthritis[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,66(19):2045-2051.
杨越,张解玉,张馨文等.清热活血方对胶原诱导性关节炎模型大鼠H3K18la及JAK2/STAT3信号通路的影响[J].中医杂志,2025,66(19):2045-2051. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2025.19.013.

YANG Yue,ZHANG Xieyu,ZHANG Xinwen,et al.Effects of Qingre Huoxue Formulation （清热活血方） on H3K18 Lactylation and the JAK2/STAT3 Signaling Pathway in Rats with Collagen-Induced Arthritis[J].Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,66(19):2045-2051. DOI： 10.13288/j.11-2166/r.2025.19.013.

摘要

目的

基于组蛋白H3的赖氨酸18位乳酸化修饰（H3K18la）与Janus激酶2/信号转导和转录激活子3（JAK2/STAT3）信号通路探讨清热活血方治疗类风湿关节炎可能的作用机制。

方法

24只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、清热活血方组、甲氨蝶呤组，每组6只。除对照组外，其余各组大鼠采用牛Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂混合制成乳化剂，建立胶原诱导性关节炎大鼠模型。自造模第1天开始，清热活血方组以20 g/（kg·d）清热活血方灌胃，每日1次；甲氨蝶呤组予每周1 mg/kg甲氨蝶呤混悬液灌胃，分别于每周二、四灌胃；对照组、模型组每日以及甲氨蝶呤组非灌胃日均以10 ml/（kg·d）灌胃生理盐水，每日1次。各组均连续灌胃4周。各组分别于第2次免疫后第6、10、14、18、22天进行关节炎指数评分；最后一次灌胃后次日取材，HE染色法检测膝关节滑膜及踝关节病理变化；ELISA法检测大鼠血清中C反应蛋白（CRP）、白细胞介素17（IL-17）水平；微量法检测滑膜中乳酸水平；免疫共沉淀法获取大鼠膝关节滑膜组织中乳酸化蛋白后Western Blot法检测滑膜中H3K18la的水平；Western Blot法检测踝关节磷酸化Janus激酶2（P-JAK2）、磷酸化信号转导和转录激活子3（P-STAT3）蛋白表达水平。

结果

病理结果显示，对照组大鼠滑膜细胞排列整齐，形态正常，无血管增生情况。模型组大鼠滑膜细胞排列杂乱，结构异常，有血管增生与大量炎性细胞浸润；与对照组比较，关节炎指数评分、CRP、IL-17水平显著增高，滑膜中乳酸、H3K18la及关节中P-JAK2、P-STAT3蛋白水平均明显增高（

＜0.01）。与模型组比较，清热活血方组及甲氨蝶呤组大鼠滑膜与关节病理显示炎性损伤减轻，关节炎指数评分、CRP、IL-17水平显著降低，乳酸、H3K18la及P-JAK2、P-STAT3蛋白水平均明显降低（

＜0.05或

＜0.01）。与甲氨蝶呤组比较，清热活血方组在大鼠膝关节及踝关节病理改变相似，以上各指标两组比较差异无显著统计学意义（

＞0.05）。

结论

清热活血方可能通过调节乳酸含量下调H3K18la水平，同时抑制JAK2/STAT3信号通路从而改善胶原诱导性关节炎模型大鼠炎症。

Abstract

Objective

To investigate the potential mechanism of

Qingre Huoxue Formulation

（清热活血方， QHF） in the treatment of rheumatoid arthritis， focusing on histone H3 lysine 18 lactylation （H3K18la） and the janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3 （JAK2/STAT3） signaling pathway.

Methods

Twenty-four male Sprague-Dawley rats were randomly divided into control group， model group， QHF group， and methotrexate （MTX） with 6 rats in each group. Except for the control group， rats were immunized with bovine type Ⅱ collagen emulsified with incomplete Freund's adjuvant to establish a collagen-induced arthritis （CIA） model. From day 1 of modeling， the QHF group received intragastric administration of 20 g/（kg·d） once daily； the MTX group received intragastric administration of MTX suspension 1 mg/kg weekly on Tuesdays and Thursdays； the control group， model group， and MTX group on non-MTX days were given normal saline 10 ml/（kg·d） once daily. All interventions lasted for 4 weeks. Arthritis index （AI） scores were assessed on days 6， 10， 14， 18， and 22 after the second immunization. After the final gavage， synovial and ankle joint tissues were collected for hematoxylin-eosin （HE） staining to observe pathological changes. Serum C-reactive protein （CRP） and interleukin-17 （IL-17） levels were measured by ELISA； lactate levels in synovium were determined by a micro-method； H3K18la levels in synovial tissue were detected by co-immunoprecipitation and Western Blot； and phosphorylated JAK2 （P-JAK2） and phospho-rylated STAT3 （P-STAT3） expression in ankle joints was measured by Western Blot.

Results

In the control group， synovial cells were well organized and morphologically normal without angiogenesis. In the model group， synovial cells were disordered with abnormal structure， angiogenesis， and massive inflammatory infiltration. Compared with the control group， AI scores， CRP， IL-17， lactate， H3K18la， and P-JAK2/P-STAT3 levels were significantly increased （

＜0.01）. Compared with the model group， both the QHF and MTX groups showed alleviated inflammatory damage in synovial and joint pathology， with significantly reduced AI scores， CRP， IL-17， lactate， H3K18la， and P-JAK2/P-STAT3 protein levels （

＜0.05 or

＜0.01）. No significant differences were found between the QHF and MTX groups across the above indices （

＞0.05）.

Conclusion

QHF may alleviate inflammation in CIA rats by regulating lactate content， downregulating H3K18la， and inhibiting the JAK2/STAT3 signaling pathway.

关键词

Keywords

references

BROWN P ， PRATT AG ， HYRICH KL . Therapeutic advances in rheumatoid arthritis ［J］. BMJ ， 2024 ， 384 ： e070856 . doi： 10.1136/bmj-2022-070856 http://dx.doi.org/10.1136/bmj-2022-070856 .

HAUGEBERG G ， HANSEN IJ ， SOLDAL DM ， et al . Ten years of change in clinical disease status and treatment in rheumatoid arthritis： results based on standardized monitoring of patients in an ordinary outpatient clinic in southern Norway ［J］. Arthritis Res Ther ， 2015 ， 17 （ 1 ）： 219 .

谢招虎，解静，吴晶金，等 . 类风湿关节炎中西医药物治疗研究概况［J］. 时珍国医国药， 2020 ， 31 （ 7 ）： 1692 - 1695 .

姜泉，曹炜，唐晓颇，等 . 清热活血方药治疗活动期类风湿关节炎的临床疗效观察［J］. 世界中西医结合杂志， 2010 ， 5 （ 7 ）： 588 - 592 .

智恺，刘春芳，曹炜，等 . 清热活血方对肿瘤坏死因子α诱导的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞迁移和黏附的影响［J］. 中医杂志， 2016 ， 57 （ 20 ）： 1777 - 1781 .

XIN Q ， WANG H ， LI Q ， et al . Lactylation： a passing fad or the future of posttranslational modification ［J］. Inflammation ， 2022 ， 45 （ 4 ）： 1419 - 1429 .

ZHANG D ， TANG Z ， HUANG H ， et al . Metabolic regulation of gene expression by histone lactylation ［J］. Nature ， 2019 ， 574 （ 7779 ）： 575 - 580 .

FU W ， WANG T ， LU Y ， et al . The role of lactylation in plasma cells and its impact on rheumatoid arthritis pathogenesis： insights from single-cell RNA sequencing and machine learning ［J］. Front Immunol ， 2024 ， 15 ： 1453587 . doi： 10.3389/fimmu.2024.1453587 http://dx.doi.org/10.3389/fimmu.2024.1453587 .

QIN Z ， WANG R ， HOU P ， et al . TCR signaling induces STAT3 phosphorylation to promote TH17 cell differentiation ［J］. J Exp Med ， 2024 ， 221 （ 3 ）： e20230683 .

PUCINO V ， CERTO M ， BULUSU V ， et al . Lactate buildup at the site of chronic inflammation promotes disease by inducing CD4 + T cell metabolic rewiring ［J］. Cell Metab ， 2019 ， 30 （ 6 ）： 1055 - 1074 .

乌日力嘎，乌兰其其格，呼日乐巴根，等 . 类风湿关节炎大小鼠动物模型研究进展［J］. 中国医药导报， 2023 ， 20 （ 20 ）： 69 - 72 .

叶冠成，陈光耀，江雯欣，等 . 类风湿关节炎动物模型研究进展［J］. 安徽中医药大学学报， 2019 ， 38 （ 5 ）： 88 - 92 .

武子英，曹炜，祁鑫，等 . 清热活血方对胶原诱导性关节炎大鼠肠道微生态及Th17/Treg平衡的影响［J］. 中国中西医结合杂志， 2018 ， 38 （ 6 ）： 681 - 686 .

CUZZOCREA S ， MCDONALD MC ， MOTA-FILIPE H ， et al . Beneficial effects of tempol， a membrane-permeable radical scavenger， in a rodent model of collagen-induced arthritis ［J］. Arthritis Rheum ， 2000 ， 43 （ 2 ）： 320 - 328 .

中华中医药学会风湿病分会 . 类风湿关节炎病证结合诊疗指南［J］. 中医杂志， 2018 ， 59 （ 20 ）： 1794 - 1800 .

姜楠，田新平，曾小峰 . 《2024中国类风湿关节炎诊疗指南》解读［J］. 协和医学杂志， 2025 ， 16 （ 1 ）： 28 - 34 .

BRAND DD ， LATHAM KA ， ROSLONIEC EF . Collagen-induced arthritis ［J］. Nat Protoc ， 2007 ， 2 （ 5 ）： 1269 - 1275 .

FELDMANN M ， ELLIOTT MJ ， WOODY JN ， et al . Anti-tumor necrosis factor-alpha therapy of rheumatoid arthritis ［J］. Adv Immunol ， 1997 ， 64 ： 283 - 350 . doi： 10. 1016/s0065-2776（08）60891-3 http://dx.doi.org/10.1016/s0065-2776（08）60891-3 .

LUBBERTS E . The IL-23-IL-17 axis in inflammatory arthritis ［J］. Nat Rev Rheumatol ， 2015 ， 11 （ 7 ）： 415 - 429 .

BANERJEE S ， BIEHL A ， GADINA M ， et al . JAK-STAT signaling as a target for inflammatory and autoimmune diseases： current and future prospects ［J］. Drugs ， 2017 ， 77 （ 5 ）： 521 - 546 .

WU JY ， CHEN YJ ， FU XQ ， et al . Chrysoeriol suppresses hyperproliferation of rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes and inhibits JAK2/STAT3 signaling ［J］. BMC Complement Med Ther ， 2022 ， 22 （ 1 ）： 73 .

ZHAO Z ， BI B ， CHENG G ， et al . Correction to： Melatonin ameliorates osteoarthritis rat cartilage injury by inhi-biting matrix metalloproteinases and JAK2/STAT3 signaling pathway ［J］. Inflammopharmacology ， 2024 ， 32 （ 2 ）： 1649 .

GARCIA-CARBONELL R ， DIVAKARUNI AS ， LODI A ， et al . Critical role of glucose metabolism in rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes ［J］. Arthritis Rheumatol ， 2016 ， 68 （ 7 ）： 1614 - 1626 .

IZZO LT ， WELLEN KE . Histone lactylation links meta-bolism and gene regulation ［J］. Nature ， 2019 ， 574 （ 7779 ）： 492 - 493 .

DAI Y ， WANG S ， LUO J ， et al . Gastrodin attenuates rheumatoid arthritis by targeting KAT8 to inhibit the lactylation of H3K9 ［J］. Front Pharmacol ， 2025 ， 16 ： 1559744 . doi： org/10.3389/fphar.2025.1559744 http://dx.doi.org/org/10.3389/fphar.2025.1559744 .

WANG YH ， GAO P ， WANG YQ ， et al . Small-molecule targeting PKM2 provides a molecular basis of lactylation-dependent fibroblast-like synoviocytes proliferation inhibition against rheumatoid arthritis ［J］. Eur J Pharmacol ， 2024 ， 972 ： 176551 . doi： 10.1016/j.ejphar.2024.176551 http://dx.doi.org/10.1016/j.ejphar.2024.176551 .

查看原文

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

脊蛇祛湿胶囊对胶原诱导性关节炎模型大鼠血清NETs水平和巨噬细胞极化的影响

防己黄芪汤对胶原诱导性关节炎模型大鼠关节组织Notch2/DLL1通路的影响

风湿宁胶囊对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞超微结构及细胞凋亡相关基因表达的影响

益肾蠲痹丸对肾虚胶原诱导性关节炎大鼠踝关节骨质破坏的影响

张震运用益髓生血汤加减治疗类风湿关节炎合并贫血经验